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          真核表達載體構建實驗

          產品介紹

          一、服務介紹
          分子克隆是在分子水平_上提供一種純化和擴增特定DNA段的方法。常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到復制與擴增,然后再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的
          基因的擴增。
          二、實驗原理
          外源DNA與載體分子 的連接就是DNA重組,這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。重組的DNA分子是在DNA連接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的連接緩沖系統中,將分別經酶切的載體分子與外源DNA分子進行連接。DNA連接酶有兩種: T4噬菌體DNA連接酶和大腸桿菌DNA連接酶。兩種DNA連接酶都有將兩個帶有相同粘性末端的DNA分子連在一起的功能 ,而且T4噬菌體DNA連接酶還有一種大腸桿菌連 接酶沒有的特性,即能使兩個平末端的雙鏈DNA分子連接起來。但這種連接的效率比粘性末端的連接效率低,-般可通過提高T4噬菌體DNA連接酶濃度或增加DNA濃度來提高平末端的連接效率。.

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