細胞轉染
產品介紹
細胞轉染是將外源分子如DNA, RNA等導入真核細胞的技術。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發展，轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中，其應用越來越廣泛。
因為不同的細胞在生理代謝及分裂上均存在差異，因此研究者將外源遺傳物質導， 入細胞的過程中需要選擇
不同的方式。目前，將外源物質導入細胞的方法主要分為三大類:
1、脂質體(或是脂質體替代物)轉染;
2、電轉;
3、病毒感染。
這三種方法互有優劣。脂質體或是脂質體替代物轉染操作簡便，價格低廉， 但是對細胞毒性大。而且,有
些細胞通過脂質體轉染效率很低，電轉操作方便快捷，但是需要專門的儀器，對細胞損傷也比較大;病毒
感染克服了前兩者的劣勢，感染效率高，對細胞毒性小，但是病毒前期包裝需更大量的時間和精力。
實驗操作流程:
1.轉染試劑的準備
a.將400u去核酸酶水加入管中,靂蕩10秒鐘，溶解脂狀物。
b.震蕩后將試劑放在- 20攝氏度保存,使用前還需需蕩。
2。選擇合適的混合比例(1: 1-1: 2脂質體[1體積: DNA質量來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體
積的無血清培養基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的ONA,電蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震
蕩。
3、將混合液在室溫放置10-15分鐘。
4、吸去培養板中的培養基，用PBS或者無血清培養基清洗- -次。
5、加入混合液，將細胞放回培養箱中培養-個小時。
6.到時后，根據細胞種類決定是否移除混合液，之后加入完全培養基繼續培養24- 48小時。
