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          產品中心

          成脂誘導

          產品介紹

          實驗操作流程:
          成骨誘導培養液配備與誘導操作:
          1.準備含10%FBS的a-MEM培養液;
          2在量好的EM培養波中添加5OuM抗壞血酸10mm微做甘油00m地塞米松;
          3、準備6吼培養板,將P4細胞按照5*103個平方重米的規格接種于
          始a-
          EM培養液中;
          4、待細胞長至基本融合后,
          更換上述制備完成的成骨誘導培養液;
          5、每三天換液一次,細胞長至7天時進行堿性研觸朝雜色;
          6、二十八天后再進行礦化結節的茜素紅染色。
          素紅染色方法介紹:
          1.去除細胞當前使用培養液,使用PBS清洗兩次;
          2使用10%甲醛室溫固定15分鐘,完成后使用重蒸倫水中洗兩次;
          3按照1ml風加入40mM的曹索紅染色波,室溫孵育20m并輕微擺蕩;
          4、清除掉沒有完全結合的染料,用重蒸饋水票洗并振蕩5min重復4次;
          5、傾斜放置2min吸取多余的重蒸溫水:倒置昱微鎮觀察拍照記錄。’
          成脂誘導培養液配備與誘導操作:
          1、配置FBS10%含重的HG DMEM培養液;
          、在限制完成的C DMIE.解液中加入川地塞米松1u/m胰島素,20時喉美辛和0 5mM BuXx,
          3、準奮6孔培養板,將P4細胞按照2x104個平方厘米的規格接種于
          票始HG-DMEM培養液中
          小待細胞長至基本融合后,更換。上述制備完成的成脂誘導培養波培養2天,
          在用只含有10ug/m1胰島素的成脂維持培養液培
          養伏,如此交替循環培養至1天,使用紅油0染色。
          紅油0染色方法介紹:
          1、去除細胞使用的當前培養液,使用PBS清洗兩次; 
          2、27 .5%甲醛室溫固定20分鐘;
          3、重蒸演水清洗3此,空氣中干燥;
          4、加入0.5%的紅油室溫孵育- -小時;
          5、配制70%乙醇溶液清洗3次;
          6、倒置顯微鏡觀察拍照記錄。

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