掃描電鏡
一、掃描電鏡服務介紹
掃描電鏡,即掃描電子顯微鏡(SEM) ,利用極狹窄的電子束去掃描樣品,進而通過電子束與樣品的相互作J用產生各種效應,原理即為利用二次電子信號成像來觀察樣品的表面形態,常用于物質表面及斷面立體結構的觀察。
二、掃描電鏡服務內容
1、清洗: - -般用pH7 2磷酸鹽緩沖
2、固定:常規法用2 5% wu二醛前固定24h (放入0- 4C冰箱中)即可。一些特殊樣品,如幼嫩的、含水量高的樣品還是用四yang化鈉后固定2h
3、脫水:乙醇系列30% - 50% -70% -85% - 95% - 100% (2次)逐級脫水,每級10-15min,塊大的應適當搖動,保證脫水干凈
4、中間液代換:分兩步。第-步用醋酸(異)wu酯:乙醇=1: 1的混合液浸泡10min,第二步用醋酸異wu酯浸泡10min,適當搖動
5、臨界點干燥:代換后的樣品轉入樣品籃中,放進預冷的臨界點干燥儀樣品室內,蓋好室蓋后注入液體二氧化碳,以淹沒樣品為準,先升溫至15它加熱10min,再升溫至35C讓其氣化,觀察液體全氣化后慢慢放氣,必須待氣放盡才能開蓋取樣
6、粘貼樣品: -般樣品可用雙面膠帶粘貼,如果樣品塊大,導電性差,必須用導電膠粘貼
7、鍍膜后入鏡觀察
三、掃描電鏡服務說明
送樣要求信息:
組織樣本
需要量:將組織切成1立方毫米左右小塊(掃描電鏡職材可稍大于該標準)固定于2. 5%wu二醛固定液
運輸: 4度冰袋運輸;
細胞樣本
細胞直接刮下,細胞懸液直接離心,棄上清,PBS清洗2次,離心成團,加入2.5%wu二醛固定液固定
運輸: 4度冰袋運輸;
微生物細菌樣本
參照細胞樣本,菌液離心后固定于wy_醛溶液,4度運輸;
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