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          細胞增殖實驗

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          細胞增殖實驗
          細胞增殖是生物體生長、發育、繁殖、遺傳的基礎,是細胞基本的生理活動。生長因子、激素及癌基因產物等均可誘導細胞的增殖或抑制細胞的增殖,通過影響細胞周期、誘導細胞凋亡而實現。

          通過細胞分裂,可以將復制的遺傳物質,平均地分配到兩個子細胞中去。細胞增殖實驗包括MTT法和CCK8法。

           

          細胞增殖實驗

          MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide。MTT比色法是常用的檢測細胞存活和生長的方法之一,其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT 還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的甲瓚,用酶標儀在490nm波長處測定其光吸收值,在細胞數范圍內,甲瓚結晶形成的量與細胞數成正比,因此490nm波長處的吸光值可間接反映活細胞數量。該方法已廣泛用于抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。

          Cell Counting Kit-8(簡稱CCK-8)試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物(Formazan dye)。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。

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