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          上海過表達慢病毒構建及包裝實驗

          產品介紹

          上海過表達慢病毒構建及包裝實驗

          1 、上海過表達慢病毒構建及包裝實驗特點:

          1.1 直接包裝成為假病毒顆粒,對分丨裂和非分丨裂細胞均有感染作用,適合RNAi研究和體內實驗中難于轉染的細胞 (比如神經元細胞、干細胞或其它原代細胞)。

          1.2 可以通過簡單方式,在短時間內獲得穩定表達特定基因的多種細胞株。

          1.3 可用于基因敲除、基因治療和轉基因動物研究。

          1.4 無需轉染試劑,操作簡便。

          1.5 可以根據客戶需要制備多種標記。

          2、原理:

          慢病毒(Lentivirus)是逆轉錄病毒的一種。構建的siRNA / miRNA慢病毒載體,與化學合成的siRNA和基于瞬時表達載體構建的普通siRNA載體相比,一方面可以擴增替代瞬時表達載體使用,另一方面,Lentivirus-siRNA克隆經過慢病毒包裝系統包裝后,可用于感染依靠傳統轉染試劑難于轉染的細胞系如原代細胞、懸浮細胞和處于非分丨裂狀態的細胞,并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組,進行長時間的穩定表達。

          3 、過表達慢病毒構建及包裝流程:

          3.1 含有目的基因的慢病毒表達載體的構建和質粒純化提取。

          注:客戶也可以提供構建好的重組慢病毒表達載體。

          3.2 慢病毒表達載體與包裝系統共轉染病毒包裝細胞。

          3.3 收集病毒液。

          3.4 純化和濃縮病毒。

          3.5 分裝、- 80 oC保存。

          3.6 滴度測定及無菌檢測。

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